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elisa檢測試劑盒的五大檢測方法介紹
更新時間:2020-06-16 點擊次數:1600次
  elisa檢測試劑盒是判斷機體免疫功能的一個重要指標,因而具有重要的實驗室研究價值,同時還可能在臨床上有諸多實用價值、包括許多疾病的診斷、病程觀察、療效判斷及細胞因子治療監測等。細胞因子試劑盒在感染科,腫瘤科等相關科室應用廣泛。
  下麵為您介紹elisa檢測試劑盒的五大檢測方法:
  1、夾心法:分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法,雙抗體夾心法具有高靈敏度、高專一性的優勢,但該法隻適用於有多個結合位點的抗原檢測,主要用於檢測各種大分子抗原--例如在醫學檢測中測定HBsAg、HBeAg、AFP等疾病相關的,以及在科研中檢測細胞因子等。由於雙抗體夾心法特異性高,在檢測過程中有時會將樣本和酶標抗體同時加入進行反應,稱為雙抗體夾心一步法,因為操作時間短,在商業化生產中有很大優勢。
  2、間接法:使用了二抗增加信號強度,也使抗體的選擇多樣化,然而間接法容易產生交叉反應。間接法隻能用於測定抗體,主要用於疾病的診斷,其優點是隻需要改變包被抗原,酶標抗體是通用的。
  3、競爭法:是用樣本中的遊離抗體/抗原與固相的酶標抗體/抗原競爭性結合的分析方法。當遊離抗體(或抗原)濃度越高,則能與固定抗原(或抗體)結合的酶標抗體(或抗原)就越少,後續顯色就越淺,即與對照相比,顯色越淺,表示檢測樣本中抗體(或抗原)含量越高。該法特別適合小分子物質的檢測也可用於檢測比較不純的樣本,且重複性好,但是檢測的靈敏度和專一性較差。
  4、捕獲法:全稱捕獲包被法也稱為反向間接法,主要用於測定血清中某類抗體亞型如IgM。為排除血清中IgG的幹擾,用抗IgM抗體包被後用於捕捉樣本中的IgM,然後加入特異性結合抗原進行後續檢測。捕獲包被法常用於對病毒性感染的早期診斷。
  在測定IgM的實驗中常受到類風濕因子(RF,一種能結合多種動物IgG Fc的自身IgM抗體)的幹擾,導致假陽性反應。采用F(ab')或Fab片段製備酶標抗體可以消除RF的幹擾,這一方法在雙抗體夾心法中也具有同樣的效用。
  5、直接法:僅需要抗原和酶標一抗,操作簡便,可避免交叉反應,然而該方法要求酶標一抗有較高的特異性要求,同時也並非所有的一抗適合標記處理。直接法在實際運用中並不多見,它並不能對樣本中抗體進行定量分析,因為樣本中抗體是非酶標抗體,無法進行後續顯色,但是該法經過改進就是競爭法。