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NEB M0202S T4 DNA 連接酶 20000U
特性
■ 高效連接粘性末端和平末端
■ T/A 克隆
■ dsDNA 切刻修複
■ 構建高豐(feng) 度克隆文庫
■ RNA 和 DNA 的連接
NEB M0202S T4 DNA 連接酶 20000U
概述
該酶催化雙鏈 DNA 或 RNA 上相鄰的 5′-磷酸末端和 3′-羥基末端形成磷酸二酯鍵。該酶不僅(jin) 能夠催化平齊末端或粘性末端之間的連接，還可以修複雙鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交雙鏈中的單鏈切刻。
來源
純化自 E. coli C600 pcl857 pPLc28 lig8。
反應條件
1X T4 DNA 連接酶反應緩衝(chong) 液
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM MgCl2，10 mM DTT，1 mM ATP]。推薦 DNA 5′ 末端濃度為(wei) 0.1-1.0 μM，16℃ 溫育。
熱失活：65℃ 10 分鍾。
單位定義（粘性末端活性單位）
1 單位指在 20 μl 1X T4 DNA 連接酶反應緩衝(chong) 液中，16℃ 反應條件下，30 分鍾能使 50% 的經 HindⅢ 消化的λDNA 片段 [ 5′ 端濃度為(wei) 0.12 μM（300 μg/ml）] 連接所需的酶量。
濃度
400,000 units/ml 和 2,000,000 units/ml。
注意事項
與(yu) E. coli DNA 連接酶需要 NAD+ 作輔因子不同，T4 DNA 連接酶的輔因子是 ATP。
稀釋後的 T4 DNA 連接酶應於(yu) -20℃、50% 甘油貯存緩衝(chong) 液（稀釋緩衝(chong) 液 A，NEB #B8001）中保存。如稀釋後馬上使用，也可用 1X T4 DNA 連接酶反應緩衝(chong) 液稀釋。
隻要在反應體(ti) 係中補加 1 mM ATP，連接反應就可以在 NEB 提供的四種限製性內(nei) 切酶緩衝(chong) 液或在
T4 DNA 多聚核苷酸激酶反應緩衝(chong) 液中進行。
T4 DNA 連接酶
貨 號
規 格
價(jia) 格
北京庫存
上海庫存
#M0202L
100,000 units
有
有
#M0202M
(高濃度5X) 100,000 units
有
有
#M0202S
20,000 units
有
有
#M0202T
(高濃度5X) 20,000 units
有
有
#M0202V
10,000 units
有
有
